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琼脂粉


琼脂粉是由琼脂糖(agarose)和琼脂果胶(agaropectin)组成的,溶解性是琼脂粉不溶于冷水,易溶于沸水,缓溶于热水。检测凝胶强度为1.5%琼脂粉溶液在20摄氏度凝固后,能够表面不破承受的最大压强是800-1200g/cm2 在生物学实验中,微生物培养基、植物组培培养基常规添加琼脂粉的用量1.5-2% (工作浓度6-25g/L)。当实验中遇到琼脂粉不凝固时,常规的检测方法时pH值,浓度,温度,充分混匀等情况。
说明:培养基的配制,工作浓度6-25g/L
用途:微生物培养基、植物培养基原材料,一般添加量1.5-2%
琼脂粉默认使用PH为中性, PH小于4则无法凝结,
脂粉质检凝胶强度为1.5%浓度,800-1200g/cm2
常见问题解答:
一,生物实验中遇到培养基加入琼脂粉后,室温不凝固的原因分析:
1、培养基PH值过低 ,偏酸,水解,琼脂粉在PH值小于4则无法凝结。
2、所加琼脂粉质量不够 ,增加用量。搅拌不均匀,倒板前没有充分摇匀,凝固不均匀。
3、灭菌温度过高,加热时间过长。PH改变或破坏了琼脂的凝固度
4、培养基没有加热溶解充分,就没有凝固。
二,琼脂粉、琼脂糖、低熔点琼脂糖在生物实验中的区别分类:
琼脂粉是由琼脂糖(agarose)和琼脂果胶(agaropectin)组成的。琼脂糖是线性的多聚物,基本结构是1,3连结的β-D-半乳呋喃糖和1,4连结的3,6-脱水α-L-半乳呋喃糖。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。它们的结构相似,但带硫酸根和羧基组分,凝胶能力差。简单地说,把琼脂中的琼脂果胶去掉,剩下的部分,就是琼脂糖。
在工业上的琼脂色泽由白到微黄,具有胶质感,无气味或有轻微的特征性气味,琼脂不溶于冷水,易溶于沸水,缓溶于热水。
琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃时形成良好的半固体状的凝胶,这是它具有多种用途的主要特征和基础。琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示。强度越高,凝胶性能越好。质量较好的琼脂糖强度通常在1200克/cm2以上(1%胶浓度)。琼脂糖的凝胶性是由存在的氢键所致,凡是能破坏氢键的因素都能导致凝胶性的破坏。琼脂糖具有亲水性,并几乎完全不存在带电基团,对敏感的生物大分子极少引起变性和吸附,是理想的惰性载体。在琼脂糖制备过程中需要把琼脂果胶尽量去除,否则琼脂糖有可能存在极微量硫酸根和丙酮酸取代电离基团,就会造成电内渗(EEO),电内渗对质点的移动产生影响。质量较好的琼脂糖硫酸根含量比较低,通常在0.2%以下,电内渗比较小,通常在0.13以下。这也就是琼脂糖比琼脂贵那么多的原因了。
问题1:使用琼脂粉配置的MS培养基颜色明显变黄?影响实验?
产品批次不一样,有些批次的琼脂粉就是显黄色,不是质量问题,不影响使用。
进口产品也有直接指出琼脂粉是黄色为正常现象。
问题2:凝胶强度?
答:凝胶强度(1.5%)≥800g/cm2  800-1200g/cm2,根据不同批次会有不同数值。
1.5g琼脂粉溶于100ml水,溶解凝固后要放置20℃恒温箱中静置10小时以上,再测定凝胶强度。与温度,水质等有关。
一般琼脂粉和卡拉胶,夏季使用浓度要比冬季偏高。夏季温度高,保存时间久,可能会有部分降解,所以要达到同样凝胶强度的用量就偏高。
问题3:琼脂粉不凝固
1、培养基PH值过低 ,偏酸,水解
2、所加琼脂量不够 ,增加用量。搅拌不均匀,倒板前没有充分摇匀,凝固不均匀。
3、琼脂质量不过关,琼脂条在使用时添加量要稍微高一点,琼脂粉是不是新买的
4、灭菌温度过高,加热时间过长。PH改变或破坏了琼脂的凝固度
5、培养基没有加热溶解够不够,就没有凝固。是不是琼脂加错了,营养琼脂不会凝固。
到平板时可以推荐在超净台内吹干晾干,蒸发过多水分。
问题4:PH与琼脂粉?
琼脂粉默认使用PH为中性,一般为7左右,PH小于4则无法凝结,具体的PH与稳定性的检测没有做过,根据经验来说 PH偏碱,凝胶后颜色稍白,PH偏酸,凝胶颜色稍暗。
问题5:琼脂粉做碳源测试,不加碳源细菌仍然能生长,上一批次的就不能生长?
答:理论上应该不长,一般微生物都不能利用琼脂粉,但某些杂菌仍可以利用,所以要检测到底是琼脂粉纯度问题还是染了杂菌。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。


注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。


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